合作伙伴：佛山某飼料廠

儀器類(lèi)型：液相色譜儀

品牌：賽默飛

型號(hào)：U3000（DAD+FLD+RID）

2025年12月18日，喜訊！譜標(biāo)科技交付佛山某飼料廠的賽默飛U3000液相色譜儀（配置DAD+FLD+RID），順利完成全鏈條服務(wù)落地。該設(shè)備可高效精準(zhǔn)檢測(cè)飼料中wei生素A、D、E含量，硬核實(shí)力與貼心服務(wù)雙獲認(rèn)可！致謝支持，聚力前行！

賽默飛（Thermo Scientific）UltiMate? 3000（U3000）高效液相色譜儀是一款模塊化、高靈敏度、高穩(wěn)定性的HPLC系統(tǒng)。當(dāng)其同時(shí)配置二極管陣列檢測(cè)器（DAD）、熒光檢測(cè)器（FLD）和示差折光檢測(cè)器（RID）時(shí)，可充分發(fā)揮多檢測(cè)器聯(lián)用優(yōu)勢(shì)，實(shí)現(xiàn)對(duì)飼料中脂溶性wei生素A、D、E的高效、精準(zhǔn)、全覆蓋檢測(cè)。

一、為什么U3000 + DAD/FLD/RID適合飼料中wei生素A/D/E分析？

? RID一般不用于這三類(lèi)維生素檢測(cè)（因靈敏度低、不能梯度洗脫），但在U3000系統(tǒng)中若用于其他成分（如糖類(lèi)、甘油），可與其他檢測(cè)器并聯(lián)使用。

二、典型分析策略（按維生素分類(lèi)）

1. wei生素A（Retinol / Retinyl Acetate）

色譜柱：C18 反相柱（如 Acclaim? 120 C18, 5 μm, 250 × 4.6 mm）

流動(dòng)相：甲醇/水 或 甲醇/乙腈（等度或梯度）

檢測(cè)器：DAD

波長(zhǎng)：325 nm（主峰），全波長(zhǎng)掃描（200–400 nm）用于峰純度驗(yàn)證

前處理：皂化 → 有機(jī)溶劑（正己烷/yi醚）提取 → 氮吹復(fù)溶

2. wei生素D?/D?

由于其紫外摩爾吸光系數(shù)低（λmax ≈ 265 nm，ε ?。?，直接DAD檢測(cè)限高（~0.1 μg/mL），推薦采用柱后衍生+FLD方案：

方法A：直接DAD法（適用于高含量預(yù)混料）

DAD檢測(cè)：265 nm

需嚴(yán)格凈化（硅膠柱/SPE）去除dan固醇等干擾物

方法B：柱后光化學(xué)衍生 + FLD（推薦，符合國(guó)標(biāo)/藥典）

原理：wei生素D經(jīng)紫外光照射生成強(qiáng)熒光吡啶啉衍生物

系統(tǒng)配置：

U3000泵 + 自動(dòng)進(jìn)樣器 + C18柱

柱后反應(yīng)器（Photochemical Reactor，如 Aura Industries 光化學(xué)衍生器）

FLD檢測(cè)：Ex ≈ 265 nm，Em ≈ 400–420 nm

靈敏度：可達(dá) 0.1–1 ng/mL，滿足飼料中痕量檢測(cè)需求

標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)：GB/T 17818-2010（飼料中wei生素D?測(cè)定）

3. wei生素E（α/γ-生育酚等）

優(yōu)選檢測(cè)器：FLD

Ex: 290–295 nm，Em: 325–330 nm

輔助檢測(cè)器：DAD（292 nm）用于確認(rèn)保留時(shí)間一致性

優(yōu)勢(shì)：FLD對(duì)生育酚天然熒光響應(yīng)高，飼料中油脂、色素等干擾小

前處理：簡(jiǎn)單提?。ㄒ掖?正己烷）即可，無(wú)需皂化（避免氧化）

三、U3000系統(tǒng)優(yōu)勢(shì)在本應(yīng)用中的體現(xiàn)

功能應(yīng)用價(jià)值

四元梯度泵（LPG-3400RS）:精確控制復(fù)雜梯度，分離VA、VD、VE及異構(gòu)體

溫控自動(dòng)進(jìn)樣器（WPS-3000TSL）:避免熱不穩(wěn)定維生素降解（如VA易氧化）

DAD全波長(zhǎng)采集:實(shí)時(shí)光譜比對(duì)，識(shí)別共流出雜質(zhì)（如飼料中類(lèi)胡蘿卜素干擾VA）

FLD高靈敏檢測(cè) :      滿足ppm級(jí)飼料添加劑定量要求（如VE常添加50–500 mg/kg）

Chromeleon CDS軟件:支持多檢測(cè)器數(shù)據(jù)同步采集、合規(guī)報(bào)告（符合GLP/GMP

四、典型飼料樣品前處理流程（簡(jiǎn)化版）

稱(chēng)樣：1–5 g 飼料粉

皂化（僅VA/VE需，VD通常不皂化）：

加抗壞血酸/焦性沒(méi)食子酸（抗氧化劑）

KOH-乙醇溶液，60–70°C 水浴30 min

提?。赫和榛蚴兔眩袷庉腿?/span>

洗滌：水洗至中性

濃縮：氮吹至近干，甲醇/乙腈復(fù)溶

過(guò)濾：0.22 μm 有機(jī)系濾膜，進(jìn)樣

?? 注意：wei生素D對(duì)光、熱、氧敏感，全程避光、加抗氧化劑、低溫操作！

五、相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法參考

GB/T 17817-2010：飼料中wei生素A的測(cè)定（HPLC法）

GB/T 17818-2010：飼料中wei生素D?的測(cè)定（HPLC法，含光化學(xué)衍生）

GB/T 17812-2008：飼料中wei生素E的測(cè)定（HPLC-FLD法）

AOAC 992.06 / 2001.13：國(guó)際通用方法

六、總結(jié)

Thermo Scientific UltiMate 3000 HPLC + DAD/FLD 聯(lián)用系統(tǒng)，通過(guò)：

DAD 準(zhǔn)確定性wei生素A，

FLD（尤其結(jié)合柱后衍生）高敏檢測(cè)wei生素D和E，

可實(shí)現(xiàn)飼料中三大脂溶性維生su的一站式、高通量、合規(guī)化檢測(cè)，全滿足飼料企業(yè)質(zhì)量控制、第三方檢測(cè)及監(jiān)管抽查的需求。